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當(dāng)誘餌蛋白IP抗體不好用或者內(nèi)源表達(dá)量低時(shí),可以在樣本中融合表達(dá)帶有特定標(biāo)簽的誘餌蛋白(Bait),利用標(biāo)簽抗體做免疫沉淀。輝駿生物ChainFree?納米抗體磁珠、coip試劑盒等產(chǎn)品助力 眾多客戶高效完成Co-IP實(shí)驗(yàn),并在知名期刊發(fā)表IF>10的高分文獻(xiàn)!
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在 COIP 實(shí)驗(yàn)中,磁珠結(jié)塊是一個(gè)令科研人員頗為頭疼的問題,不僅會(huì)影響蛋白結(jié)合效率,導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)性差,還可能使大量時(shí)間和精力付諸東流。輝駿生物ChainFree? 納米抗體磁珠在 COIP 實(shí)驗(yàn)中表現(xiàn)卓越,磁珠粒徑均勻,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的均一性與穩(wěn)定性,能夠精準(zhǔn)地富集目標(biāo)蛋白 - 蛋白復(fù)合物,減少非特異性結(jié)合,讓W(xué)B條帶更清晰。同時(shí),在蛋白質(zhì)純化領(lǐng)域,可高效分離出高純度的目標(biāo)蛋白,滿足科研及生物制藥等多方面需求。
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IP(免疫沉淀),是指利用抗體來沉淀目標(biāo)蛋白,并同時(shí)沉淀它的結(jié)合伙伴(可以是蛋白、DNA片段或者RNA),以確定它們之間的相互作用關(guān)系。
Co-IP、RIP、ChIP三種實(shí)驗(yàn)在操作流程上有所不同,但原理和實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)是一致的。輝駿生物以沉淀結(jié)合蛋白為例,講解IP實(shí)驗(yàn)的組別設(shè)計(jì),并標(biāo)注了IP結(jié)果的各個(gè)條帶所代表的含義。
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輝駿生物的ChainFree?標(biāo)簽納米抗體磁珠(Flag、HA、V5、GFP、mCherry),除了徹底解決輕重鏈污染問題,經(jīng)序列改造的 ChainFree? 納米抗體對靶蛋白親和力提升 3-5 倍,具有更高的親和力,單次實(shí)驗(yàn)僅需 5μl-20μl 即可實(shí)現(xiàn)高效免疫沉淀。小劑量高回報(bào):減少抗體用量的同時(shí),降低非特異性結(jié)合,實(shí)驗(yàn)成本直降 50%!
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蛋白質(zhì)間相互作用是其發(fā)揮功能的主要模式,蛋白質(zhì)通過結(jié)合不同的伙伴來行駛不同功能,形成復(fù)雜的信號網(wǎng)絡(luò)。免疫共沉淀(Co-IP)、pull down、熒光共定位等都是最常見的蛋白互作研究方法。輝駿生物的合作伙伴——中山大學(xué)腫瘤中心華南腫瘤學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室在Cancer Research(1區(qū),IF=12.5)上發(fā)表的論文,就同時(shí)采用了Co-IP和GST pull down方法,研究了糖原合成酶2(GYS2)在乙肝病毒相關(guān)性肝癌中的機(jī)制。
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RNA pulldown探針制備先確定目標(biāo)序列,根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康拇_定合適的RNA序列,可以是目標(biāo)轉(zhuǎn)錄本的全部序列或部分序列,對照組通常采用反義序列,也可以是無關(guān)序列.如果目標(biāo)序列小于100bp,建議直接合成帶標(biāo)記的RNA,如果大于100bp,可按照輝駿生物提供的步驟體外轉(zhuǎn)錄獲得.為解決RNA探針標(biāo)記的難題,輝駿生物研發(fā)了一種新的標(biāo)記方法,利用一段只有16nt的RNA標(biāo)簽“F2”來標(biāo)記RNA,100%標(biāo)記,操作簡單,成本低
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RNA pulldown用于檢測RNA-蛋白質(zhì)、或RNA-RNA之間相互作用的技術(shù),其基本原理是:利用帶標(biāo)簽的目標(biāo)RNA探針與待測蛋白質(zhì)或RNA進(jìn)行體外或體內(nèi)結(jié)合,通過親和作用將復(fù)合物分離出來,之后采用Western Blot、質(zhì)譜技術(shù)檢測結(jié)合蛋白或采用qPCR、測序技術(shù)檢測結(jié)合RNA。輝駿生物研發(fā)了一種新的標(biāo)記方法,利用一段只有16nt的RNA標(biāo)簽“F2”來標(biāo)記RNA,再采用與F2具有強(qiáng)大親和力的配體磁珠捕獲互作復(fù)合體。這種標(biāo)記方法可用于標(biāo)記各種類型的RNA(lnRNA、mRNA、circRNA、pre-miRNA或pri-miRNA),操作簡單、成本低。
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難道沒有完全無污染的抗體beads嗎?當(dāng)然有!結(jié)合多年的互作實(shí)驗(yàn)和質(zhì)譜經(jīng)驗(yàn),輝駿生物開發(fā)了專門解決輕重鏈污染問題的ChainFree?納米抗體磁珠,涵蓋了目前主流的多種標(biāo)簽,比如Flag、HA、Myc、V5、GFP、RFP。該磁珠上偶聯(lián)了經(jīng)過嚴(yán)格篩選、優(yōu)化并重組表達(dá)的無輕、重鏈的標(biāo)簽抗體,完全解決了抗體污染問題
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輝駿生物可提供rip、rip seq、rip qpcrS實(shí)驗(yàn),價(jià)格低 周期短,可對圍繞RNA結(jié)合蛋白開展的整體課題提供全方位方案建議.RIP/RIP-seq或RNA免疫沉淀/RNA免疫沉淀測序是一種高通量實(shí)驗(yàn)技術(shù),用于研究RNA和RNA結(jié)合蛋白之間的相互作用。它允許識(shí)別細(xì)胞或組織內(nèi)的特定RNA結(jié)合蛋白。
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蛋白測序主要是依靠化學(xué)或酶消化的方法來分離多肽并檢測氨基酸殘基的數(shù)量和組成,輝駿生物可對多種蛋白樣品提供蛋白質(zhì)測序,蛋白從頭測序等服務(wù),輝駿基于高精度、高分辨率質(zhì)譜設(shè)備,結(jié)合自主研發(fā)的測序技術(shù)平臺(tái),能夠?qū)崿F(xiàn)對目標(biāo)蛋白氨基酸序列的精準(zhǔn)解讀.該技術(shù)可以用于解析任何純蛋白樣本,比如工具酶、突變蛋白、單克隆抗體等
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蛋白質(zhì)質(zhì)譜分析是指在蛋白質(zhì)研究和表征中使用質(zhì)譜分析,包括蛋白質(zhì)的定量、分析、相互作用圖譜以及翻譯后修飾的鑒定。 蛋白質(zhì)質(zhì)譜分析也可稱為基于質(zhì)譜的蛋白質(zhì)組學(xué)。 基于質(zhì)譜的蛋白質(zhì)組學(xué)由三種方法組成:自上而下、中下和自下而上的蛋白質(zhì)組學(xué)。
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輝駿生物提供抗體測序技術(shù)服務(wù),抗體從頭測序服務(wù),單克隆抗體從頭測序服務(wù),蛋白質(zhì)測序,抗體解析,抗體表達(dá)等多類抗體實(shí)驗(yàn)外包基于高精度、高分辨率質(zhì)譜設(shè)備,結(jié)合自主研發(fā)的測序技術(shù)平臺(tái),實(shí)現(xiàn)對抗體氨基酸序列的精準(zhǔn)解讀。同時(shí),我們有自建的高通量表達(dá)驗(yàn)證平臺(tái),能夠?qū)σ褱y得的抗體序列進(jìn)行高通量表達(dá)驗(yàn)證,從而保證交付抗體的活性。蛋白質(zhì)測序最有用的應(yīng)用之一是確定抗體序列。有爭議的是,蛋白質(zhì)測序是目前可用于闡明抗體編碼的最合適的技術(shù)。特別是重新蛋白質(zhì)測序是抗體測序的完美應(yīng)用,因?yàn)樗苊饬嘶谕葱缘臄?shù)據(jù)庫搜索中的隨機(jī)或偏倚引入。